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如何检验蛋白质

2024-09-22 11:39:49 编辑:zane 浏览量:584

如何检验蛋白质

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如何检验蛋白质

如何检验蛋白质?目前测定蛋白质的方法可分为两大类:

(1)是利用蛋白质的共性,即含氮量 、肽键和折射率测定蛋白质含量 ;

(2)利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基团以及芳香基团等测定蛋白质含量的方法检验蛋白质。下面为大家介绍几种方法。

凯氏定氮法 在有催化剂的条件下,用浓硫酸处理样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下,将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。

双缩脲法 双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物会呈紫色。

染料结合法 利用来源相同的蛋白质和碱性(或酸性)氨基酸含量大体相同这一特点,加人过量的酸性(或碱性)染料,使其和蛋白质形成不溶性盐而沉淀析出,以分光光度计测定反应前后溶液的透明度。(考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种)。

Folin-酚试剂法 试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基还原,产生深蓝色。

紫外分光光度法 在一定浓度范围内,蛋白质溶液在最大吸收波长处的吸光度与其浓度成正比。

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